BET sustentável e confiável usando ensaio fluorométrico de fator C recombinante
Número de catálogo
Nº de catálogo | Descrição | Sensibilidade EU/ml |
RFC100TA | Kit de Ensaio de Endotoxina BETMAT™ rFC (Método Fluorimétrico do Fator C Recombinante), 100 Testes/Kit | 0.01-10EU/ml |
RFC100TB | 0,005-5EU/ml |
Características do produto: Detecção de endotoxinas bacterianas baseada em fluorescência com fator C recombinante (rFC)
Sustentabilidade robusta:
Ao eliminar o uso de sangue de caranguejo-ferradura para extração do lisado, o Fator C recombinante é geneticamente modificado para proteger espécies ameaçadas de extinção e prevenir a sobrepesca. Essa abordagem sustentável está alinhada com iniciativas globais de conservação ambiental e de biorrecursos, apoiando práticas de produção ecológicas e em conformidade com as normas.
Alta confiabilidade de detecção:
Com alta especificidade, o rFC reage exclusivamente com endotoxinas bacterianas e não é afetado por impurezas como o β-glucano, minimizando resultados falso-positivos e falso-negativos. O ensaio atinge uma sensibilidade de até 0,005 EU/mL e oferece uma ampla faixa de detecção linear. Sua repetibilidade e precisão estão em conformidade com os padrões das farmacopeias internacionais (USP, Eur.P), garantindo resultados estáveis, consistentes e rastreáveis.
Ampla aplicabilidade e conveniência:
Compatível com diversos tipos de amostras, incluindo vacinas, anticorpos monoclonais e extratos de dispositivos médicos, o ensaio rFC oferece um fluxo de trabalho simplificado, adequado para sistemas de teste automatizados e análises de alto rendimento. O ciclo de teste típico é de 1 a 2 horas, melhorando significativamente a eficiência do laboratório.
Alto nível de segurança e estabilidade:
Livre de componentes de origem animal, o reagente elimina os riscos de contaminação associados aos reagentes LAL tradicionais. Apresenta mínima variação entre lotes, condições de armazenamento flexíveis e longa vida útil, reduzindo custos operacionais e desperdício de materiais.
Aplicações dos reagentes para teste de endotoxina do fator C recombinante (rFC)
Fator C recombinante (rFC) A tecnologia de detecção de endotoxinas rFC é uma alternativa sustentável, geneticamente modificada, ao tradicional teste de lisado de amebócitos de Limulus (LAL). Ela reconhece especificamente o lipopolissacarídeo (LPS), uma endotoxina bacteriana Gram-negativa, com alta sensibilidade e resistência a interferências. É amplamente utilizada nas indústrias farmacêutica, de dispositivos médicos, biológica, em testes laboratoriais e no monitoramento ambiental. Na indústria farmacêutica, a rFC é utilizada para controlar endotoxinas em matérias-primas, injetáveis e biofármacos, garantindo a segurança dos medicamentos. No setor de dispositivos médicos, ela pode detectar traços de endotoxinas nas superfícies de produtos descartáveis e implantáveis ou em soluções de enxágue. Em terapias avançadas, como vacinas e terapias celulares e gênicas, a rFC pode medir com precisão as endotoxinas em amostras complexas, atendendo aos requisitos das farmacopeias globais. Ela também é utilizada para testar sistemas de cultura celular, consumíveis de laboratório, água farmacêutica e amostras ambientais. O ensaio rFC não é apenas preciso e eficiente, mas também está alinhado com o conceito de desenvolvimento sustentável e está gradualmente se tornando o novo padrão internacional para testes de endotoxinas.
Informações técnicas sobre o ensaio fluorimétrico do fator C recombinante (rFC) para detecção de endotoxinas bacterianas
O ensaio fluorimétrico rFC é um método in vitro, livre de caranguejo-ferradura, para a detecção quantitativa de endotoxinas bacterianas (lipopolissacarídeo, LPS), em conformidade com as farmacopeias globais (USP , EP 2.6.14). Seu princípio fundamental baseia-se no Fator C recombinante (rFC) — uma proteína recombinante produzida a partir do domínio de ligação ao LPS do Fator C do caranguejo-ferradura — eliminando a dependência do sangue natural do caranguejo-ferradura e abordando preocupações de sustentabilidade.
1. Princípio do Ensaio
A endotoxina LPS liga-se especificamente ao domínio de reconhecimento de LPS da rFC, desencadeando uma mudança conformacional que ativa a atividade da serina protease da rFC. A intensidade da fluorescência do AMC é diretamente proporcional à concentração de endotoxina na amostra, mensurável por meio de um leitor de microplacas de fluorescência.
2. Principais parâmetros técnicos
Sensibilidade: Detecta endotoxinas em concentrações tão baixas quanto 0,005 EU/mL, igualando ou superando os ensaios tradicionais de lisado de amebócitos de Limulus (LAL).
Faixa linear: Normalmente abrange de 0,005 a 50 EU/mL, permitindo análises quantitativas em um amplo espectro de concentrações.
Especificidade: Apresenta alta especificidade para LPS; não é ativado por (1→3)-β-D-glucanos (uma interferência comum em ensaios de gel-coagulação LAL), reduzindo resultados falso-positivos.
Condições de incubação: Requer temperatura controlada (37±1°C) e tempo de incubação (60–120 minutos), com fluorescência medida em comprimentos de onda de excitação/emissão de ~360 nm/~460 nm.
3. Visão geral do fluxo de trabalho
Preparar amostras (ex.: produtos farmacêuticos, dispositivos médicos, produtos biológicos) por meio de diluição ou extração para remover interferências da matriz.
Misture o reagente rFC, o substrato fluorogênico e a amostra em um poço da microplaca.
Incubar a 37°C para permitir a ligação, ativação e clivagem do substrato LPS-rFC.
Medir a intensidade da fluorescência; calcular a concentração de endotoxina usando uma curva padrão gerada com padrões de endotoxina conhecidos (por exemplo, LPS de Escherichia coli O55:B5).
Este ensaio combina sustentabilidade (sem necessidade de captura de caranguejos-ferradura), confiabilidade (baixa interferência, alta reprodutibilidade) e eficiência, tornando-o ideal para o controle de qualidade nas indústrias farmacêutica e biotecnológica.